重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白

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重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白

綠色熒光蛋白（greenfluorescentprotein，簡(jiǎn)稱GFP）是一種能在藍(lán)色波長(zhǎng)光線激發(fā)下發(fā)出熒光的特殊蛋白質(zhì)，正是這種神奇的性質(zhì)，讓它成為當(dāng)今生物化學(xué)領(lǐng)域較有力的工具之一，被稱為“生物北斗"。GFP在科學(xué)研究上有著驚人的用途，因?yàn)樗軌蚴刮覀冎苯涌吹郊?xì)胞內(nèi)部的運(yùn)動(dòng)、分布情況。在任何特定的時(shí)間我們都可以輕易地找出GFP的定位和存在：你只需要用紫外光去照射，這時(shí)所有的GFP都將發(fā)出鮮艷的綠色光芒。顯微鏡下的微觀世界與我們看到的宏觀世界極為不同，而GFP的作用是在微觀與宏觀間架起一座橋梁，讓科學(xué)家通過(guò)觀察發(fā)光效應(yīng)推測(cè)出物質(zhì)在分子水平上的活動(dòng)。讓生物化學(xué)家們?cè)谘芯考?xì)胞、蛋白、基因的水平上，從顯微鏡下獲得滿意的結(jié)果。         綠色螢光蛋白在細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)領(lǐng)域中，通常被用作為一個(gè)報(bào)導(dǎo)基因（reporter gene）。一些經(jīng)修飾過(guò)的型式可作為生物探針，由于GFP熒光有著生物細(xì)胞的自主功能，其熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物，因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報(bào)告蛋白，其作用是任何其它酶類報(bào)告的蛋白是比不上的。

簡(jiǎn)單做個(gè)實(shí)驗(yàn)：把GFP連接到你有興趣觀察的任何對(duì)象上。比如，你可以把它連接到一種病毒上。然后，隨著病毒在宿主體內(nèi)不斷擴(kuò)散，你就可以通過(guò)跟蹤發(fā)出的綠色螢光來(lái)觀察病毒的擴(kuò)散途徑；或者你把它接合到一種蛋白質(zhì)上并通過(guò)顯微鏡觀察它在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)或遷移。

目前由我公司自主研發(fā)的重組增強(qiáng)型綠色螢光蛋白及相關(guān)抗體，是目前較為優(yōu)質(zhì)的蛋白和抗體。

GFP在腫瘤發(fā)病機(jī)制研究中的應(yīng)用

GFP是一個(gè)分子量較小的蛋白，易與其他一些目的基因形成融合蛋白且不影響自身的目的基因產(chǎn)物的空間構(gòu)象和功能。GFP與目的基因融合，將目的基因標(biāo)記為綠色，若將熒光蛋白植入到動(dòng)物的某個(gè)細(xì)胞的DNA分子結(jié)構(gòu)中，可定量分析目的基因的表達(dá)水平，顯示其在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)位置和量的變化，為探討該基因在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其分子機(jī)制，提供了便利條件。

在腫瘤的形成過(guò)程中，增殖和凋亡是一對(duì)相互矛盾的統(tǒng)一體。若腫瘤細(xì)胞凋亡占優(yōu)勢(shì)，腫瘤組織將長(zhǎng)期處于休眠狀態(tài)或自行消亡。腫瘤細(xì)胞的凋亡受凋亡相關(guān)基因調(diào)控。用GFP轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)基因，并與正常組織進(jìn)行比較，則大致可判斷此基因?yàn)橐种颇[瘤細(xì)胞凋亡的基因；反之，為促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的基因。

腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)是腫瘤細(xì)胞粘連、酶降解、移動(dòng)和基質(zhì)內(nèi)增殖等一系列過(guò)程的表現(xiàn)，其根本原因在于腫瘤細(xì)胞內(nèi)某些基因表達(dá)異常。利用GFP 的示蹤特性，研究腫瘤細(xì)胞內(nèi)某些基因異常表達(dá)與腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)的關(guān)系，即可揭示腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)的某些機(jī)制。